蓝耳病在我国各省市普遍流行,临床症状与猪瘟、伪狂犬、猪细小病毒病、猪乙型脑炎、猪弓形体病等症状相似,仅从临床症状及大体剖检病变很难进行确诊,必须依赖实验室检测。用于病原学检测的方法主要有病毒分离鉴定、核酸探针技术、RT-PCR检测和免疫组化方法。目前RT-PCR已有商品化试剂盒可供操作,在大型养殖企业的实验室中正逐步发挥敏感、特异及时确诊的作用,在该病突发时,能够做到快速诊断及时采取措施,从而最大限度的降低损失。 随着病毒核酸提取技术的不断改进,RT-PCR试剂盒操作的快捷性能也在不断提升,目前商品化试剂盒已经由异硫氰酸胍法提取病毒RNA、 Tripoli方法提取病毒RNA逐步转变为利用心柱内硅基质膜提取,省去了繁杂的步骤和对离心机等设备的较高要求,越来越为基层实验室提供了应用的便利。另外,对于进行大量监测和深入研究工作的实验室,为了提高工作效率、最大程度的降低污染的可能性、对病毒核酸含量进行量化,实时荧光RT-PCR试剂盒是首要的选择。北京世纪元亨动物防疫技术有限公司,正是基于以上原因,积极研制开发了猪繁殖与呼吸综合征病毒(通用型、变异型)柱式提取改良的普通 RT-PCR试剂盒和猪繁殖与呼吸综合征病毒(通用型、变异型)柱式提取荧光RT-PCR试剂盒。使用者应结合自己的实际工作需要和实验室基础设施配备情况进行选择使用普通RT-PCR方法或实时荧光RT-PCR方法;根据以下介绍选择选择不用类型的检测试剂盒: 1、猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR诊断试剂盒(通用型)。 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反转录聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测猪血清、精液和组织中的PRRSV,适用于PRRSV的检测、诊断和流行病学调查。 2、猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR诊断试剂盒(变异株)。 本试剂采用RT-PCR方法检测猪肺、脑等脏器组织和血清中的PRRSV(Nsp2 1594-1680变异株)的RNA,适用于PRRSV(Nsp2 1594-1680变异株)的诊断、检测和流行病学调查。 3、血清学检测 对送检的5份血清,以猪蓝耳病乳胶凝集诊断试剂盒进行血清学检测。取猪蓝耳病抗原50微升滴于洁净载被片上,再滴上待检血清50微升,充分混匀,涂成直径为1.5~2厘米的圆面,1~3分钟后观察结果。如出现肉眼可见的凝集现象(白色小点),可判断为阳性,无凝集反应、浑浊,判断为阴性。结果血清抗体阳性率为80%。
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